一、产品介绍
1、原理及适用范围
菌落总数是指样品经过处理,在一定条件下培养后所得1 mL(g)检样或单位面积样品中所含菌落的总数,是常用的微生物检测项目。菌落总数检测板是一种预先制备好的一次性培养基产品,含有标准的营养培养基,吸水凝胶和脱氢酶指示剂氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在检测板上呈红色,这样可缩短计数时间和增强计数效果。本产品适合于各类食品及食品原料中菌落总数的测定。执行标准:《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》(GB 4789.2)。
2、操作方法
2.1 样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌磷酸缓冲稀释液(或生理盐水)的取样罐或均质袋内,制成1:10的样品匀液,需要时用1 mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液调节样品匀液pH至6.6~7.2。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1 mL,注入含有9 mL稀释液的试管内,振摇后成为1:100的样品匀液,以此类推,做出1:1000等稀释度的样品匀液,每次换一支吸管。
2.2 接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将菌落总数检测板置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1 mL样品匀液滴加到检测板内,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,让样品匀液均匀吸附在滤纸上,静置10s左右,待样品匀液被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两片。同时做一片空白阴性对照。
2.3 培养:将检测板叠在一起,倒置于恒温培养箱内。一般食品培养温度为36℃±1℃,培养15~24 h;水产品培养温度为30℃±1℃,培养48h。
3、结果判读
细菌在检测板上生长后会显示红色斑点,选择菌落数适中(30~300 CFU)的检测板进行计数,乘以稀释倍数后即为每毫升(或每克)样品中所含的细菌菌落总数。
4、计数原则及报告方式
4.1 若只有一个稀释度检测板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个检测板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克(或毫升)样品中菌落总数结果。
4.2 若有两个连续稀释度的检测板菌落数在适宜计数范围内时,按式(1)计算:
稀释度 |
1:100(第一稀释度) |
1:1000(第二稀释度) |
菌落数 |
232,244 |
33,35 |